Cre/loxP系统简介

来源于噬菌体P1的Cre/loxP系统主要包括2个重要组成部分：一个是loxP位点，另一个就是可以对loxP位点进行识别的Cre酶，可以实现对目的基因删除、翻转、易位和序列互换。利用特异性的启动子使Cre酶在特异性的组织器官表达，实现对特定的组织或细胞的基因的操作，同时可以在Cre/loxP体系中添加ERT2，实现在特定时间对目的基因的操作。(更多Cre体系相关内容，可参考【知识分享】一半海水、一半火焰，分子表达操控中高频出现的Cre、Flp、Dre等重组酶系统如何工作)

病毒载体介导的Cre/loxP系统，除了具备以上特点之外，相较于转基因小鼠，可以大大缩短实验的周期。另外，多种多样的病毒载体，可以很大限度的满足各类实验的需求。各类病毒载体的特点如下：




病毒载体介导的Cre/loxP系统应用案例

利用ADV介导的Cre体系可以实现对特定组织器官的快速敲除。美国爱因斯坦医学院的Rajat Singh团队[1]，利用ADV载体携带Cre酶基因，注射到Atg7f/f工具鼠棕色脂肪组织，对脂肪组织Atg7基因进行编辑，5天后对Atg7表达进行分析，Atg7显著减少。


利用LV介导的Cre体系整合至基因组的特性，可以实现稳定细胞株的构建。荷兰马斯特里赫特大学医学中心Anita Kneppers研究团队[2]，利用LV病毒载体构建了一种基于Cre/loxP的细胞融合报告体系，实现成肌细胞-肌管融合后荧光素酶的条件表达。


rAAV具有免疫原性低、多血清型、长时间表达等特点，在体内研究中广泛应用。德国慕尼黑大学Oliver J. Muller 研究团队[3]利用AAV-TnT-Cre特异性对成年小鼠心脏的基因进行敲除，从而替代MerCreMer-Tamoxifen体系，避免Tam对心脏功能产生的副作用。


scAAV即自互补AAV，弥补了rAAV病毒载体表达较慢的缺点，感染3天后即可表达，同时可长时间稳定表达。德国慕尼黑工业大学Stefan Engelhardt研究团队[4]，利用scAAV-iCre对miR-29 b2cfl/fl 小鼠心肌细胞的miR-29 b2c进行特异性敲除。